verižna reakcija s polimerazo angleško polymerase chain reaction, PCR
Metoda, ki omogoča ciklično pomnoževanje določenega odseka dvoverižne DNA s termostabilno DNA-polimerazo. Odsek pomnoževanja določata dva kratka začetna oligonukleotida, ki sta komplementarna koncema tarčnega zaporedja DNA, ki ga želimo pomnožiti. Termostabilna DNA-polimeraza lahko v primerni reakcijskih zmesi, ki vsebuje matrično DNA, začetne oligonukleotide, deoksiribonukleotide in magnezijev klorid, podaljšuje začetne oligonukleotide, ki se vežejo na matrično DNA, in omogoča nastanek kopij tega zaporedja matrične DNA. Vsak cikel reakcije PCR sestavljajo tri stopnje: denaturacija, kjer se verigi matrične DNA pri visoki temperaturi ločita, prileganje začetnih oligonukleotidov, kjer se pri nižji temperaturi začetni oligonukleotidi vežejo na komplementarna zaporedja v verigah DNA, in sinteza DNA, ko z zvišanjem temperature do ustrezne optimalne temperature delovanja DNA-polimeraze omogočimo podaljševanje začetnih oligonukleotidov in s tem sintezo nove komplementarne verige. S ponavljanjem omenjenih treh stopenj lahko pomnožimo izbrani odsek DNA. Običajno izvedemo približno 30 ciklov, v katerih pomnoževanje poteka eksponentno.
Dostopnost
Dostopnost